7-11. 真核細胞中での発現制御系
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1) 真核細胞内で働くプロモーター
細胞
で高い
遺伝子発現
を期待する場合には
ウイルスプロモーター
を用いる
動物であれば
SV40
,
サイトメガロウイルス
,
レトロウイルス
,
アデノウイルス
などのものを使う
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他方、生理的環境に近い状態で発現させるのであれば、細胞由来
プロモーター
を用いる
e.g.
βアクチン
、
伸長因子1
、
U6
など
植物では
カリフラワーモザイクウイルス
の
35S RNA
のプロモーターが汎用される
2) 転写後シグナルと翻訳シグナル
真核細胞
での効率的
翻訳
に
イントロン
が必要なため、通常は
コード領域
の前にイントロンを置く
また
mRNA
の安定化と翻訳の効率化のため、
終止コドン
の下流に
ポリAシグナル
を置く必要もある
さらに効率翻訳が低下しないようにするため、5'非翻訳領域(
5'UTR
:
untranslated region
)が
AUG
配列を含まないようにする
リボソーム
を積極的に
mRNA
の開始
AUG
コドンの前に結合させるため、5'UTR内に、
ポリオウイルス
の
IRES
(
internal ribosome entry site
:
内部リボソーム侵入配列
)などを加えることもある